上海千实精密机电科技有限公司：根据广西肥料协会下达的《广西肥料协会关于下达2022年第六批团体标准项目计划的通知》精神，由广西壮族自治区分析测试研究中心提出的《黄花蒿中青蒿素含量的测定 液相色谱-三重四级杆质谱法》(征求意见稿)标准编写工作已完成。依据《广西肥料协会团体标准管理办法(试行)》有关规定，现向社会公众公开征求意见。

　　黄花蒿(Artemisia annua L.),又名香蒿、青蒿、臭蒿、犱蒿等，是双子叶植物纲、菊科、蒿属一年生草本植物，挥发性气味特异，具有清热解暑、抗疟疾、退黄等功效。黄花蒿提取物含有多种活性成分，包括倍半萜类、黄酮类、挥发油类、香豆素类及其他等。青蒿素主要来源于传统中药黄花蒿，研究表明其具有强大的抗疟作用，是我国唯一能获得国际认可的抗疟药物。但是近年来随着研究的深入，青蒿素其它作用也越来越多被发现和应用研究，大量的研究表明青蒿素及其衍生物不仅具有抗肿瘤、免疫调节、预防骨质疏松、抗菌作用，抗病毒作用也同样瞩目。

　　不同产地、不同生长时期的黄花蒿，青蒿素含量有所区别，黄花蒿的规范栽培受到了重视，因此制定规范标准进行测定黄花蒿中青蒿素含量对黄花蒿的品质控制具有重要的意义。本标准主要针对黄花蒿中青蒿素的测定进行研究，从前处理方法、测试方法进行优化，形成一套完整的测试流程，检出限低、检测时间短、稳定性好、准确度高。

　　本标准的制定，除了能准确测定黄花蒿中青蒿素的含量，作为黄花蒿质量控制的标准之一，也为其它植物中青蒿素的测定提供重要参考价值。

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。参考GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法规程内容编制。

　　本文件规定了黄花蒿中青蒿素含量的液相色谱-三重四级杆质谱测定方法。本文件适用于黄花蒿中青蒿素含量的测定，其它植物可参照执行。

　　原理：

　　用乙腈超声提取试样中的青蒿素，采用基质分散固相萃取剂净化，液相色谱-三重四级杆质谱进行测定，外标法定量。

　　仪器和设备：

　　1.液相色谱-三重四级杆质谱仪：配有电喷雾(ESI)离子源。

　　2.离心机：4000 r/min。

　　3.分析天平：感量 0.0001g。

　　4.超声波。

　　5.烘箱。

　　分析步骤：

　　1.提取

　　称取样品0.1g(精确至0.001g)于50mL聚丙烯塑料离心管中,加入25mL乙腈，室温振荡3min， 30℃超声30min，4000r/min离心5min，取上清液。

　　2.净化

　　取1mL上述上清液于预先称有20mg PSA和50mg C18的2mL聚丙烯塑料离心管中，振荡1 min，在4000 r/min离心5min。取上清液过0.22μm有机微孔滤膜。滤液供液相色谱-三重四级杆质谱测定。

　　定量测定：

　　根据试样中被测物的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如超出仪器线性响应范围应进行稀释。并且保证标准工作液和待测液中的青蒿素响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下青蒿素的参考保留时间为 3.8 min，标准溶液的多反应监测色谱图见附录B。

　　结果计算和表述：

　　液相色谱-三重四级杆质谱法测定试样中青蒿素采用标准曲线法定量，标准曲线法定量结果按公式计算，计算结果应扣除空白值。

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